厭氧盒作為一種重要的實驗室工具，主要用于在無氧或低氧環(huán)境下培養(yǎng)微生物，尤其是厭氧菌。其使用與操作要點涉及準備階段、操作過程、注意事項等多個方面，以下是對這些要點的詳細闡述。

　　一、準備階段

　　1.器材準備：首先，需要準備相應的實驗器材，如培養(yǎng)基、試管、移液器、鑷子等，并確保這些器材已經(jīng)過高溫和高壓消毒，以保證實驗的潔凈度。同時，厭氧盒本身也需要進行清潔和消毒處理。

　　2.環(huán)境準備：實驗環(huán)境應保持無菌，通常需要在超凈工作臺或無菌室內(nèi)進行操作。此外，還需準備好氮氣、混合氣體（如N2:H2:CO2=85%:10%:5%）等氣體源，以及真空泵、流量計等輔助設(shè)備。

　　3.厭氧盒檢查：打開厭氧盒前，應檢查其密封性是否良好，確保無漏氣現(xiàn)象。同時，觀察該工具內(nèi)部的紫色色帶（如果有的話），確保其完整且未變色，這有助于判斷盒內(nèi)是否已達到厭氧狀態(tài)。

　　二、操作過程

　　1.放置樣品：在無菌操作環(huán)境下，將要進行培養(yǎng)的微生物樣品用移液器均勻滴入培養(yǎng)盒中，注意控制樣品的體積，避免超過培養(yǎng)盒的最高液位線。

　　2.密封厭氧盒：將培養(yǎng)盒的蓋子迅速且緊密地蓋上，確保盒內(nèi)空氣被排出。在密封過程中，應避免觸摸或移動內(nèi)部的紫色色帶。

　　3.氣體置換：利用真空泵和氣體源進行多次氣體置換，以排除盒內(nèi)的氧氣并充入氮氣或混合氣體。通常需要進行多次置換（如三次以上），以確保盒內(nèi)形成穩(wěn)定的厭氧環(huán)境。

　　4.催化除氧（如適用）：對于某些類型的厭氧盒，可能需要打開內(nèi)置的除氧劑（如鈀粒除氧劑）和接通除氧催化器電源進行催化除氧。這一步驟有助于進一步降低盒內(nèi)的氧含量。

　　5.培養(yǎng)觀察：將密封好的厭氧盒放入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中，設(shè)置好所需的溫度和時間等培養(yǎng)條件。在培養(yǎng)過程中，應定期檢查該工具的密封性和厭氧狀態(tài)（如通過觀察紫色色帶是否變色）。培養(yǎng)結(jié)束后，打開工具觀察微生物的生長情況并進行記錄和分析。

　　三、注意事項

　　1.無菌操作：整個操作過程中應嚴格遵守無菌操作規(guī)范，避免雜菌污染。

　　2.氣體置換：在進行氣體置換時，應確保充入的氣體流量適中且穩(wěn)定，避免產(chǎn)生過大的氣流擾動影響厭氧環(huán)境的形成。

　　3.密封性檢查：每次使用前和使用后都應檢查厭氧盒的密封性是否良好，如有漏氣現(xiàn)象應及時處理。

　　4.安全使用：在操作過程中應注意安全用電和用氣避免發(fā)生觸電或氣體泄漏等安全事故。

　　5.定期維護：厭氧培養(yǎng)箱及其配套設(shè)備應定期進行清潔和維護保養(yǎng)以確保其正常運行和延長使用壽命。

　　厭氧盒的使用與操作要點涉及多個方面需要實驗人員在操作前做好充分的準備和檢查工作并嚴格遵守操作規(guī)程和注意事項以確保實驗的順利進行和結(jié)果的準確性。