冰凍切片包埋劑的成分及如何去除?
更新時(shí)間:2023-03-09 點(diǎn)擊次數(shù):653次
冰凍切片包埋劑是一種用于固定組織、使得組織變得硬化并使其易于切片的化學(xué)物質(zhì)。主要由以下幾種成分組成:
1.聚合物
冰凍切片包埋劑的主要成分是聚合物,通常是一種可包埋的聚合物,如乙二醇二甲基亞硝酰胺(DDAO)、聚酰亞胺(PAI)等。這些聚合物可以形成一個(gè)堅(jiān)硬的、可切割的支架結(jié)構(gòu),使得組織能夠在其中保持形狀。
2. 填充物
填充物是為了使得聚合物能夠覆蓋整個(gè)樣本所需的一組物質(zhì)。最常見(jiàn)的填充物是甘油、乙二醇和丙二醇。這些物質(zhì)能夠保護(hù)組織并且讓聚合物分散均勻。
3. 交聯(lián)劑
交聯(lián)劑是用于讓聚合物在固定組織時(shí)變得硬化并達(dá)到最終目的的一種化學(xué)物質(zhì),可以使得聚合物形成一個(gè)更加結(jié)實(shí)的、耐高溫、耐冷凍性能的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。常見(jiàn)的交聯(lián)劑是甲烷磺酸(MS)。
二、去除冰凍切片包埋劑的方法
冰凍切片包埋劑常常被用于樣本的冰凍切片和冰凍解剖。但是用后的冰凍切片包埋劑需要如何去除呢?以下介紹幾種常見(jiàn)的去除方法:
1. 利用溶劑
通常,幾種化學(xué)溶劑能夠很好地溶解冰凍切片包埋劑,如甲醇、乙醇、戊二醛等。與水混合使用時(shí),它們通常需要按照一定的比例混合才能更好地去除包埋劑。因此,如果我們想快速地去除劑,可以考慮使用一些化學(xué)溶劑,這樣既能去除包埋劑,又能保留組織的形態(tài)。
2. 氧化還原
某些物質(zhì),如氫氧化鈉和氯酸,能夠促進(jìn)氧化還原反應(yīng),進(jìn)而促進(jìn)聚合物與組織的脫離。在將冰凍樣本處理過(guò)程中,添加一定量的氫氧化鈉和氯酸,能夠幫助讓包埋劑更快地降解。當(dāng)然,這種方法也有缺點(diǎn),即影響組織形態(tài)。
3. 切割冰凍樣本
在冰凍樣本處理過(guò)程中,可能出現(xiàn)一些冰凍切片包埋劑殘留在樣本內(nèi)的情況。如果存在此情況,可以考慮切割冰凍樣本。要想切割冰凍樣本,必須首先將樣本冰凍至一定溫度,然后將其定位到切片機(jī)上,在旋轉(zhuǎn)刀片的同時(shí)用力推壓樣本,直至切下樣本。
總之,冰凍切片包埋劑是一種在生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用的化學(xué)物質(zhì),但是這種化學(xué)物質(zhì)的氣味刺鼻且難以去除,因此在使用過(guò)程中,必須做好包埋劑的去除工作。上述幾種方法都能夠很好地去除包埋劑,但是在使用過(guò)程中要注意其對(duì)組織形態(tài)可能會(huì)產(chǎn)生的影響。